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信号通路
英文名称: Human Phosphorylation Bruton'S Tyrosine Kinase (P-Btk) ELISA Kit
别名: P-BTK
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.083ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
布鲁顿酪氨酸激酶(简称Btk或BTK),又称酪氨酸蛋白激酶BTK,是一种酪氨酸激酶,由BTK基因编码,它在B细胞发育中起着关键作用。BTK包含五个不同的蛋白质相互作用结构域。这些结构域包括一个氨基末端的pleckstrin同源性(PH)结构域、一个富含脯氨酸的TEC同源性(TH)结构域、SRC同源性(SH)结构域SH2和SH3,以及一个具有酶活性的激酶结构域。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人磷酸化布鲁顿酪氨酸激酶(P-BTK)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人磷酸化布鲁顿酪氨酸激酶(P-BTK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的P-BTK, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.1
1.4
0.88
0.58
0.37
0.27
0.2
0.07
校正OD 值
2.01
1.31
0.79
0.49
0.18
0.18
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人P-BTK , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.8-101.0
96.10
细胞培养上清(n=8)
95.5-108.7
104.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人P-BTK , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
87.9-96.9
92.60
90.2-110.9
96.10
1:04
范围
平均回收率
87.7-108.9
98.70
105.8-115.3
108.60
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