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英文名称: Human Phosphorylated exo-spindle polar-like protein 1(ESPL1) ELISA Kit
别名: ESPL1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.158ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷酸化外纺锤体极样蛋白1（ESPL1）是一种参与细胞有丝分裂的关键蛋白，属于分离酶（separase）家族。ESPL1通过其蛋白酶活性，在细胞分裂的后期阶段切割黏连蛋白复合体的亚基SCC1（RAD21），从而解除姐妹染色单体间的黏连，促进染色体的正确分离。这一过程对于维持基因组的稳定性和染色体数目正常传递至关重要。ESPL1的活性受到严格的磷酸化调控。在有丝分裂前期，ESPL1被抑制性磷酸化修饰而失活；当细胞进入分裂后期，通过特定激酶的去磷酸化作用，ESPL1被激活并发挥其蛋白酶功能。ESPL1的异常表达或调控失常可能导致染色体分离错误，进而引发染色体数目异常，与肿瘤发生、发育缺陷等疾病密切相关。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人磷酸化外纺锤体极样蛋白1(ESPL1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人磷酸化外纺锤体极样蛋白1(ESPL1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ESPL1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.31
1.85
1.35
1.09
0.78
0.42
0.23
0.08
校正OD 值
2.22
1.76
1.26
1
0.33
0.33
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ESPL1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.4-101.6
96.80
血浆(n=8)
92.4-106.3
103.30
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.5
105.20
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ESPL1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.3-95.6
90.90
88.1-97.7
93.30
90.3-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.20
87.7-108.6
98.70
105.0-114.2
107.20
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