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信号通路
英文名称: Human solubility Signal Transducer and Activator Of Transcription 1 (p-STAT1) ELISA Kit
别名: p-STAT1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.15ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
信号传导子及转录激活子1(STAT1)是一种转录因子,由STAT1基因编码。它是STAT蛋白家族的一个成员。磷酸化的STAT1(p-STAT1)形成同源或异源二聚体进入细胞核,可调控靶基因表达。STAT蛋白在产生后分布于胞质中,作为潜在的转录因子,需要磷酸化才能滞留在细胞核中。未磷酸化的STAT蛋白会穿梭于细胞质和细胞核之间等待激活信号。一旦磷酸化激活了的STAT蛋白达到细胞核,就会识别带有γ激活序列(GAS)的启动子,来激活这些干扰素诱导的基因表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人磷酸化信号传导子及转录激活子1(p-STAT1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人磷酸化信号传导子及转录激活子1(p-STAT1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的p-STAT1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.48
1.45
0.93
0.54
0.36
0.24
0.16
0.06
校正OD 值
2.39
1.36
0.84
0.45
0.15
0.15
0.07
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人p-STAT1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.3-101.5
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.6-105.0
101.30
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人p-STAT1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.7
91.20
88.6-96.7
93.50
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.8
94.80
87.8-108.6
98.50
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