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信号通路
英文名称: Human Glypican 3 (GPC3) ELISA Kit
别名: GPC3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3）是一种蛋白质，由GPC3基因编码。GPC3基因位于X染色体（Xq26）上，其中最常见的基因（异构体2）编码一个70kDa的核心蛋白，有580个氨基酸。已检测到三个变体，其编码的交替拼接形式被称为异构体1、异构体3和异构体4。GPC3的蛋白核心由两个亚单位组成，其中N端亚单位的大小约为40kDa，C端亚单位的大小约为30kDa。在哺乳动物中已经发现了6个glypicans（GPC1-6）。细胞表面的硫酸肝素蛋白多糖是由一个膜相关的蛋白核心与数量不等的硫酸肝素链替代组成。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GPC3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.1
1.78
1.51
1.04
0.76
0.45
0.3
0.07
校正OD 值
2.01
1.69
1.42
0.95
0.36
0.36
0.21
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人GPC3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.3-101.9
96.80
血浆(n=8)
92.4-105.5
102.40
组织匀浆(n=8)
96.5-108.5
105.80
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人GPC3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.5
91.70
88.9-96.2
93.80
89.8-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.3
94.50
87.8-108.9
98.60
105.4-115.3
108.30
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