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信号通路
英文名称: Human Thioredoxin (Trx) ELISA Kit
别名: Trx
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
硫氧化还原蛋白(Trx)是一个12kD的氧化还原酶蛋白,在人类中,硫氧化还原蛋白由TXN和TXN2基因编码。它也有一个特有的三级结构,称为硫氧化还原蛋白折叠。硫氧化还原蛋白由黄酶硫氧还蛋白还原酶在NADPH依赖性反应中保持还原状态,也充当过氧化物酶和核糖核酸还原酶的电子供体。相关的谷氨酸还原蛋白共享硫氧还蛋白的许多功能,但由谷胱甘肽而非特定的还原酶进行还原。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人硫氧化还原蛋白(Trx)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人硫氧化还原蛋白(Trx)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Trx, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.15
1.69
1.14
0.85
0.52
0.34
0.25
0.12
校正OD 值
2.06
1.6
1.05
0.76
0.25
0.25
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Trx , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.5-105.8
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.6
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人Trx , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.5
91.30
88.9-96.9
93.70
90.2-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.9
94.30
87.9-108.4
98.70
105.9-115.0
108.80
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