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信号通路
英文名称: Human Thiopurine Methyltransferase (TPMT) ELISA Kit
别名: TPMT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.152ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
硫嘌呤S甲基转移酶(TPMT),也被称为硫嘌呤甲基转移酶,是由TPMT基因编码的酶,它是一种催化硫嘌呤类化合物甲基化的酶。该位点的假基因位于染色体18q上。它甲基化硫嘌呤化合物。甲基供体是S-腺苷-L-蛋氨酸,它被转化为S-腺苷-L-同型半胱氨酸。该酶通过S-腺苷-L-蛋氨酸作为S-甲基供体和S-腺苷-L-同型半胱氨酸作为副产物代谢硫嘌呤药物。该基因的缺陷导致6MP的甲基化减少和失活减少,导致骨髓毒性增强,这可能导致骨髓抑制、贫血、出血倾向、白细胞减少和感染。TPMT活性调节硫嘌呤前药的细胞毒性作用。这种酶的天然底物尚未确定。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人硫嘌呤S甲基转移酶(TPMT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人硫嘌呤S甲基转移酶(TPMT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TPMT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.24
1.63
1.01
0.55
0.44
0.31
0.25
0.09
校正OD 值
2.15
1.54
0.92
0.46
0.22
0.22
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人TPMT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-103.2
96.90
血浆(n=8)
92.1-105.4
101.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人TPMT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.2
91.90
86.5-96.1
93.70
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.7
93.10
87.6-108.9
98.20
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