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信号通路
英文名称: Human Microphthalmia Associated Transcription Factor (MITF) ELISA Kit
别名: MITF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
眼小畸形关联转录因子(MITF),也被称为E类碱性螺旋环螺旋蛋白32或bHLHe32,是由MITF基因编码的蛋白质。它是一种基本的螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链转录因子,涉及多种类型细胞(包括黑素细胞,破骨细胞和肥大细胞)的谱系特异性通路调节。术语"谱系特异性",因为它与MITF有关,意味着仅在特定细胞类型中发现的基因或性状。因此,它可能参与信号级联的重新布线,这些级联反应是其正常细胞前体的生存和生理功能特别需要的。它与转录因子EB(TFEB)、TFE3和TFEC一起属于相关bHLHZip蛋白的亚家族,称为MiT-TFE家族转录因子。这些因子能够形成稳定的DNA结合同源和异源二聚体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人眼小畸形关联转录因子(MITF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人眼小畸形关联转录因子(MITF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MITF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.66
1.97
1.36
0.83
0.51
0.32
0.2
0.08
校正OD 值
2.57
1.88
1.27
0.74
0.23
0.23
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MITF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.4-103.9
99.30
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.6
104.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人MITF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.7-98.8
93.60
90.4-110.4
96.10
1:04
范围
平均回收率
87.6-108.7
100.10
105.0-115.9
108.40
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