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信号通路
英文名称: Human Leukemia Inhibitory Factor (LIF) ELISA Kit
别名: LIF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 10.32pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白血病抑制因子(LIF)是一种白细胞介素6类细胞因子,通过抑制分化影响细胞生长。当LIF水平下降时,细胞会进行分化。LIF与特定的LIF受体(LIFR-α)结合,后者与该受体家族所有成员共有的特定亚基--GP130信号转导亚基形成一个异质体。这导致了JAK/STAT(Janus激酶/信号转导者和转录激活者)和MAPK(有丝分裂原激活蛋白激酶)级联的激活。LIF通常在发育中的胚胎滋养层表达,其受体LIFR在整个内细胞群中表达。由于胚胎干细胞来自囊胚阶段的内细胞团,将它们从内细胞团中移除,也就消除了其LIF的来源。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人白血病抑制因子(LIF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人白血病抑制因子(LIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的LIF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.23
1.42
0.83
0.5
0.31
0.23
0.18
0.08
校正OD 值
2.14
1.33
0.74
0.41
0.14
0.14
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人LIF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.0
96.90
血浆(n=8)
91.9-105.0
101.60
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.0
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人LIF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-96.8
92.60
88.2-96.8
93.10
90.9-110.2
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.1
94.80
87.9-108.7
98.90
105.8-115.0
108.30
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