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信号通路
英文名称: Human Interleukin 8 (IL-8) ELISA Kit
别名: IL-8
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500pg/mL
灵敏度: 3.4pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素8(IL-8)是一种由巨噬细胞和其他细胞类型如上皮细胞、气道平滑肌细胞和内皮细胞产生的趋化因子。内皮细胞将IL-8储存在它们的储存囊中,即Weibel-Palade体。白细胞介素8(IL-8)由CXCL8基因编码。IL-8最初以99个氨基酸的前体肽产生,然后经过裂解产生几种活性IL-8异构体。在培养中,72个氨基酸的肽是巨噬细胞分泌的主要形式.表面膜上有许多能够结合IL-8的受体;最常研究的类型是G蛋白偶联的蛇形受体CXCR1和CXCR2。这两种受体的表达和对IL-8的亲和力不同(CXCR1 > CXCR2)。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人白细胞介素8(IL-8)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人白细胞介素8(IL-8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IL-8, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
2.51
1.76
1.14
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.67
1.05
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IL-8 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.7
96.60
血浆(n=8)
92.1-105.7
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.2
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IL-8 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.0
91.10
88.2-96.9
93.70
90.2-110.2
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.30
87.3-108.1
98.80
105.5-115.8
108.10
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