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信号通路
英文名称: Human Interleukin 4 (IL4) ELISA Kit
别名: IL-4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100pg/mL
灵敏度: 0.27pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素4(IL-4)是一种多效应细胞因子,主要由嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和Th2细胞等多种细胞分泌,在许多细胞中均能够发挥免疫调节功能。IL-4作为B细胞的激活因子,其能够调解B细胞表面免疫球蛋白的分型转换,尤其是IgG和IgE之间的转换。IL-4还能够调控前体辅助T细胞向Th2亚型分化。IL-4与TNF-α协同作用能够诱导血管内皮细胞和平滑肌细胞表面VCAM-1的表达,从而选择性招募嗜酸性粒细胞和淋巴细胞到达炎症部位。同时,IL-4还能下调IL-1,TNF-α和PGE2等炎症因子的产生。此外,IL-4在体内外均表现出了一定的抗肿瘤活性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人白细胞介素4(IL-4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人白细胞介素4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IL-4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.31
1.52
1.01
0.63
0.44
0.32
0.24
0.09
校正OD 值
2.22
1.43
0.92
0.54
0.23
0.23
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IL-4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.9
96.80
血浆(n=8)
92.3-105.3
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.2
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IL-4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.9
91.70
88.2-96.0
93.10
90.9-110.4
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.3
94.20
87.9-108.1
98.40
105.4-115.6
108.30
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