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信号通路
英文名称: Human Interleukin 27 (IL-27) ELISA Kit
别名: IL-27
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.26pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素27(IL-27)是由EBI3和p28亚单位通过二硫键构成的异源二聚体。IL-27可以促进Th1和Tr1分化, 抑制Th2、Th17及Treg应答, 在免疫调节方面具有重要作用。IL-27 属于IL-12家族成员,主要由抗原提呈细胞,包括树突状细胞、巨噬细胞等在微生物或其他免疫刺激物刺激下产生,其受体广泛分布于多种免疫细胞。IL-27信号通过细胞上的异源二聚体受体IL-27R传导至胞内。IL-27R由WSX-1和gp130亚基构成。WSX-1和gp130可以在包括T细胞、NK细胞、B细胞、髓系细胞等多种细胞上表达。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人白细胞介素27(IL-27)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人白细胞介素27(IL-27)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IL-27, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.51
1.96
1.24
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.87
1.15
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IL-27 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.4
96.20
血浆(n=8)
92.8-105.5
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.4
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IL-27 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.5
91.40
88.8-96.5
93.10
90.0-110.3
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.4
94.60
87.3-108.9
98.50
105.8-115.6
108.20
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