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信号通路
英文名称: Human Interleukin 25 (IL-25) ELISA Kit
别名: IL-25
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100pg/mL
灵敏度: 0.38pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
IL-25是一种细胞因子,与IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D和IL-17F一起属于IL-17细胞因子家族。所有成员都有同源的氨基酸序列片段和空间上保守的半胱氨酸。正是IL-25在功能和结构上与其他成员不同。IL-25有一个异质二聚体受体。该受体由两个亚单位IL-17RA和IL-17RB组成。IL-17RA亚单位也是IL-17A和IL-17F的共同点。而IL-17RB也是IL-17B所共有的。这两个亚单位受体对IL-25的功能都是必不可少的。IL-25由许多细胞类型产生。这些细胞包括T细胞、树突状细胞、巨噬细胞、肥大细胞、嗜碱性细胞、嗜酸性细胞、上皮细胞和Paneth细胞。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人白细胞介素25(IL-25)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人白细胞介素25(IL-25)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IL-25, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.44
1.87
1.29
0.83
0.58
0.38
0.27
0.08
校正OD 值
2.35
1.78
1.2
0.74
0.29
0.29
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IL-25 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.5
96.50
血浆(n=8)
92.6-105.0
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.2
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IL-25 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.4
91.90
88.4-96.3
93.20
90.3-110.6
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.5
94.90
87.6-108.6
98.40
105.4-115.9
108.60
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