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信号通路
英文名称: Human Growth Associated Protein 43 (GAP-43) ELISA Kit
别名: GAP-43
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
生长相关蛋白43(GAP43)是由GAP43基因编码的一种蛋白质。它是一种神经组织特异性的细胞质蛋白,可以通过半胱氨酸3和4上的双棕榈酰化序列与膜相连。这个序列将GAP43锁定在脂质筏上。GAP43是一种主要的蛋白激酶C(PKC)底物,被认为在神经元的形成、再生和可塑性方面发挥着关键作用。GAP-43在中枢神经系统发育中的作用并不限于对轴突的影响。它也是中心体的一个组成部分,不表达GAP-43的分化神经元显示中心体和有丝分裂主轴的错位,特别是在神经源细胞分裂中。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人生长相关蛋白43(GAP-43)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人生长相关蛋白43(GAP-43)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GAP-43, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.29
1.29
0.71
0.43
0.29
0.2
0.18
0.07
校正OD 值
2.2
1.2
0.62
0.34
0.11
0.11
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人GAP-43 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.2
96.20
血浆(n=8)
93.6-105.5
102.20
细胞裂解液(n=8)
96.2-108.5
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞裂解液中加入高浓度人GAP-43 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.9
91.80
88.2-96.7
93.60
90.6-110.9
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.30
87.6-108.8
98.60
105.4-115.1
108.10
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