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信号通路
英文名称: Human Growth Hormone Receptor (GHR) ELISA Kit
别名: GHR
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.42ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
生长激素受体(GHR)是一种蛋白质,由GHR基因编码。在大多数哺乳动物中都发现了GHR的同源物。该基因编码的蛋白质是生长激素的跨膜受体,生长激素与受体结合导致预组装的受体二聚体的重新定向(然而受体也可能在细胞表面以单体形式存在),并激活细胞内和细胞间的信号转导途径,导致生长。它以两种形式存在,一种是全长的膜结合受体,另一种是可溶性的GH结合蛋白(GHBP)。GHR在其胞外结构域中含有两个纤维蛋白III型β结构域,而胞内结构域含有酪氨酸激酶JAK2与SH2蛋白的结合点。JAK2是生长激素的主要信号转导者。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人生长激素受体(GHR)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人生长激素受体(GHR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GHR, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.47
1.91
1.34
0.87
0.61
0.42
0.31
0.09
校正OD 值
2.38
1.82
1.25
0.78
0.33
0.33
0.22
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人GHR , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.3-101.4
96.60
细胞培养上清(n=8)
96.2-107.4
104.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人GHR , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.8-95.3
92.40
90.8-110.0
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.4
94.60
105.4-115.3
109.40
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