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信号通路
英文名称: Human Cyclooxygenase-2 (COX 2) ELISA Kit
别名: COX-2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.25-80ng/mL
灵敏度: 0.6ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
环氧化酶-2(COX-2)又称前列腺素内过氧化物合成酶 2(HUGO PTGS2)。PTGS2(COX-2)将花生四烯酸(AA)转化为前列腺素内过氧化物 H2。 PTGS 是非甾体抗炎药和 PTGS2(COX-2)特异性抑制剂(称为 coxibs)的靶点。 PTGS-2 是一种序列同源二聚体。 该酶的每个单体都有一个过氧化物酶和一个 PTGS(COX)活性位点。 PTGS (COX) 酶通过两个步骤催化 AA 转化为前列腺素。 首先,从花生四烯酸的碳 13 中抽取氢,然后由 PTGS2(COX-2)加入两分子氧,生成 PGG2。 其次,PGG2 在过氧化物酶活性位点被还原成 PGH2。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人环氧合酶2(COX-2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人环氧合酶2(COX-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的COX-2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
80
40
20
10
5
2.5
1.25
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人COX-2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.9
96.70
血浆(n=8)
92.0-105.7
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.7
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人COX-2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.50
88.7-96.2
93.50
90.0-110.7
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.0
94.70
87.2-108.4
98.90
105.7-115.0
108.20
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