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信号通路
英文名称: Human Heat shock protein HSP90(hsp-90)
别名: HSP-90
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.6ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
热休克蛋白 90(HSP-90)是一种伴侣蛋白,协助其他蛋白质正常折叠,稳 定蛋白质以对抗热应力,并协助蛋白质降解。它还能稳定肿瘤生长所需的一 些蛋白质。热休克蛋白,作为一个类别,是所有物种中表达量最高的细胞蛋 白之一。热休克蛋白在温度升高的情况下保护细胞。它们在未受压的细胞中 占总蛋白质的 1-2%。然而,当细胞被加热时,热休克蛋白的比例增加到细 胞蛋白的 4-6%。热休克蛋白 90(HSP90)是热相关蛋白中最常见的一种。” 90“即它的质量大约为 90 千道尔顿。一个 90 千道尔顿的蛋白质被认为是相 当大的非纤维蛋白。HSP90 存在于细菌和真核生物的所有分支中,但在古细 菌中显然不存在。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人热休克蛋白90(HSP-90)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人热休克蛋白90(HSP-90)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HSP-90, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.96
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.87
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人HSP-90 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.1
96.50
血浆(n=8)
92.3-105.9
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.5
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人HSP-90 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.6
91.30
88.3-96.4
93.60
90.0-110.0
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.0
94.70
87.6-108.1
98.80
105.3-115.7
108.80
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