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信号通路
英文名称: Human Ubiquitin Specific Peptidase 14 (USP14) ELISA Kit
别名: USP14
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.15ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
泛素特异性肽酶14(USP14),也被称为泛素硫酯酶14或去泛素化酶14,是由USP14基因编码的酶。该基因编码泛素特异性加工(UBP)蛋白酶家族的成员,该蛋白酶是一种具有His和Cys结构域的去泛素化酶(DUB)。它位于细胞质中,并切割从泛素前体融合和泛素化蛋白质泛素部分。它是趋化因子受体CXCR4降解所必需的,这对于CXCL12诱导的细胞趋化性至关重要。它通过与ERN1相互作用抑制未折叠内质网蛋白的降解,还可作为非应激条件下内质网相关降解(ERAD)的生理抑制剂。它对于神经肌肉接头(NMJ)的突触发育和功能必不可少。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人泛素特异性肽酶14(USP14)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人泛素特异性肽酶14(USP14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的USP14, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.59
1.47
0.81
0.48
0.33
0.23
0.21
0.08
校正OD 值
2.5
1.38
0.72
0.39
0.14
0.14
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人USP14 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
82.2-101.6
97.20
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆中加入高浓度人USP14 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
85.3-95.8
91.80
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.1
96.60
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