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信号通路
英文名称: Human Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) ELISA Kit
别名: Uch-L1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 37.06pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
泛素羧基端水解酶L1(泛素C末端水解酶L1,UCH-L1)是一种去泛素化酶。它是一个基因家族的成员,其产物能水解泛素的小C端加合物,生成泛素单体。UCH-L1的表达对神经元和弥漫性神经内分泌系统的细胞及其肿瘤有高度特异性。它大量存在于所有的神经元中(占大脑总蛋白的1-2%),在神经元和睾丸/卵巢中特异性表达。UCH-L1的催化三联体包含90位的半胱氨酸、176位的天冬氨酸和161位的组氨酸,负责其水解酶的活性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人泛素C末端水解酶L1(Uch-L1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人泛素C末端水解酶L1(Uch-L1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Uch-L1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
2.31
1.59
0.99
0.6
0.4
0.27
0.19
0.07
校正OD 值
2.22
1.5
0.9
0.51
0.18
0.18
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Uch-L1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.2
96.60
细胞裂解液(n=8)
92.9-105.4
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.3-109.2
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人Uch-L1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.2
91.80
88.7-96.9
93.30
90.5-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
94.10
87.3-108.5
98.10
105.5-115.3
108.80
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