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信号通路
英文名称: Human Ubiquitin (Ub) ELISA Kit
别名: Ub
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 6.25-400ng/mL
灵敏度: 3.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
泛素(Ub)存在于真核生物的大多数组织中，也就是说，它是无处不在的。它于1975年首次被确认，泛素蛋白本身由76个氨基酸组成，其分子质量约为8.6kDa。它通过与大量的目标蛋白结合，发挥其无数的功能。20世纪80年代初，Aaron Ciechanover、Avram Hershko和Irwin Rose在Technion阐明了泛素的基本功能和泛素化途径的组成部分，并因此于2004年获得了诺贝尔化学奖。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人泛素(Ub)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人泛素(Ub)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Ub, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
400
200
100
50
25
12.5
6.25
0
OD值
2.32
1.5
0.87
0.52
0.35
0.24
0.18
0.08
校正OD 值
2.23
1.41
0.78
0.43
0.15
0.15
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Ub , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.0-103.4
98.10
血浆(n=8)
92.3-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.5
104.30
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人Ub , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-97.3
93.40
88.7-96.3
93.10
90.8-110.0
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.2
94.90
87.2-108.5
98.10
105.0-115.3
108.10
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