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信号通路
英文名称: Human Aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit
别名: AQP-4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.24ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Aquaporin-4,又称AQP4,是一种由人类AQP4基因编码的水通道蛋白。AQP4属于aquaporin家族,是一种通过细胞膜传导水分的整体膜蛋白。AQP4的结构由六个跨膜结构域和五个连接环组成通道。通过X射线晶体学研究,发现 "每个AQP4单体由六个螺旋状的跨膜结构域和两个短螺旋段组成,围绕着一个狭窄的水孔。"在最窄处,水孔的尺寸为2.8埃,刚好够水分子单行通过。虽然每个单体都能单独运水,但通道的四级结构是四聚体。AQP4单体组装成四聚体的过程与其他水汽素通道相似。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人水通道蛋白4(AQP-4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人水通道蛋白4(AQP-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的AQP-4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人AQP-4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.5
105.60
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人细胞培养上清中加入高浓度人AQP-4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
90.5-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
105.8-115.3
108.30
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