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信号通路
英文名称: Human Sequestosome 1 (SQSTM1) ELISA Kit
别名: SQSTM1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.115ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
死骨片1(SQSTM1)既Sequestosome-1是一种由SQSTM1基因编码的蛋白质。它也被称为泛素结合蛋白p62,它是一种自噬体货物蛋白,针对与它结合的其他蛋白进行选择性自噬。通过与GATA4相互作用并针对它进行降解,它可以抑制GATA-4相关的衰老和衰老相关的分泌表型。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人死骨片1(SQSTM1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人死骨片1(SQSTM1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的SQSTM1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.12
1.16
0.7
0.42
0.27
0.21
0.18
0.08
校正OD 值
2.03
1.07
0.61
0.33
0.12
0.12
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人SQSTM1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.9-101.9
96.60
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.3
102.90
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人SQSTM1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.7
91.30
89.8-96.0
93.10
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.6
94.70
87.8-108.2
98.30
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