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信号通路
英文名称: Human Dolichyl-diphosphooligosaccharide—protein glycosyltransferase subunit 1 (RPN1) ELISA Kit
别名: RPN1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.8ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核糖体结合糖蛋白Ⅰ,也被称为RPN1,由RPN1基因编码。该基因编码仅在粗糙的内质网中发现的I型整体膜蛋白。编码的蛋白质是N-低聚糖转移酶复合物的一部分,该复合物将高甘露糖低聚糖与在新生多肽链的Asn-X-Ser/ Thr共识基序中发现的天冬酰胺残基联系起来。该蛋白质形成26S蛋白酶体的调节亚基的一部分,并可能介导泛素样结构域与该蛋白酶体的结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人核糖体结合糖蛋白Ⅰ(RPN1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人核糖体结合糖蛋白Ⅰ(RPN1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的RPN1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.28
1.91
1.43
0.97
0.62
0.38
0.22
0.07
校正OD 值
2.19
1.82
1.34
0.88
0.29
0.29
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人RPN1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
83.1-101.1
97.80
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆中加入高浓度人RPN1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
85.6-95.8
91.60
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
98.50
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