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信号通路
英文名称: Human Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha (IkBa) ELISA Kit
别名: IkBα
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 8.2pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
IκBα(核因子κB 抑制因子α)是细胞蛋白家族的一个成员,其功能是抑制 NF-κB 转录因子。IκBα通过掩盖 NF-κB 蛋白的核定位信号(NLS)并使其 在细胞质中保持非活性状态而抑制 NF-κB。此外,IκBα阻止 NF-κB 转录因 子与 DNA 结合的能力,而这是 NF-κB 正常运作所必需的。编码 IκBα蛋白 的基因在一些霍奇金淋巴瘤细胞中发生突变;这种突变使 IκBα蛋白失活,从 而导致 NF-κB 在淋巴瘤肿瘤细胞中长期处于活跃状态,这种活性有助于这些 肿瘤细胞的恶性状态。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人核因子κB抑制因子α(IkBα)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人核因子κB抑制因子α(IkBα)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IkBα, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.41
1.73
1.1
0.63
0.36
0.24
0.16
0.12
校正OD 值
2.32
1.64
1.01
0.54
0.15
0.15
0.07
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人IkBα , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.2-105.6
102.60
细胞裂解液(n=8)
96.7-108.8
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人IkBα , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.1-96.1
93.50
90.4-110.0
96.30
1:04
范围
平均回收率
87.5-108.1
98.20
105.7-115.8
108.30
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