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信号通路
英文名称: Human Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B (RANk) ELISA Kit
别名: RANκ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核因子κB受体激活因子(RANκ)又称TRANCE受体或TNFRSF11A,是肿瘤坏死因子受体(TNFR)分子亚家族的一员。它是RANK-配体(RANKL)的受体,是调节破骨细胞分化和激活的RANK/RANKL/OPG信号传导途径的一部分。它与骨重塑和修复、免疫细胞功能、淋巴结发育、热调节和乳腺发育有关。它的细胞质结构域与TRAFs 1、2、3、5和6结合,将信号传递给下游目标,如NF-κB和JNK。它在骨骼肌、胸腺、肝脏、结肠、小肠、肾上腺、破骨细胞、乳腺上皮细胞、前列腺、血管细胞和胰腺中表达。最常见的是,NF-κB的激活是由RANKL介导的,但仅RANK的过度表达就足以激活NF-κB途径。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人核因子κB受体激活因子(RANκ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人核因子κB受体激活因子(RANκ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的RANκ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.48
1.45
0.93
0.54
0.36
0.24
0.16
0.06
校正OD 值
2.39
1.36
0.84
0.45
0.15
0.15
0.07
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人RANκ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.7-101.6
96.30
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.6
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人RANκ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.0-94.2
90.90
90.0-110.7
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.0
94.40
105.3-115.6
108.90
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