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信号通路
英文名称: Human Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit
别名: RAGE;AGER
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)是一种35千牛顿的免疫球蛋白超级家族的跨膜受体,其名称来源于其结合高级糖化终产物(AGE)的能力,主要包括糖蛋白,其糖类已经通过Maillard反应进行了非酶性修饰。鉴于其在先天免疫中的炎症功能和通过一个共同的结构样检测一类配体的能力,RAGE常被称为模式识别受体。RAGE至少还有一个激动性配体:高流动性组蛋白B1(HMGB1)。HMGB1是一种细胞内DNA结合蛋白,对染色质重塑很重要,它可以由坏死细胞被动释放,也可以由巨噬细胞、自然杀手细胞和树突状细胞主动分泌。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人晚期糖基化终末产物受体(RAGE;AGER)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人晚期糖基化终末产物受体(RAGE;AGER)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的RAGE;AGER, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人RAGE;AGER , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.1
96.90
血浆(n=8)
92.6-105.1
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.1
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人RAGE;AGER , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.6
91.10
88.8-96.5
93.20
90.7-110.7
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.3
94.20
87.2-108.0
98.60
105.0-115.5
108.20
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