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信号通路
英文名称: Human Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)
别名: PCNA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
抗增殖细胞核抗原（PCNA）是一种 DNA 钳，在真核细胞中充当 DNA 聚合 酶δ的促进因子，对复制至关重要。PCNA是一个同源三聚体，通过环绕DNA实现其活性，在那里它作为一个支架招募参与 DNA 复制、DNA修复、染色 质重塑和表观遗传学的蛋白质。该基因所编码的蛋白存在于细胞核中，是 DNA 聚合酶 delta 的辅助因子。编码的蛋白作为一个同源三聚体，有助于提 高 DNA 复制过程中前导链合成的效率。在应对DNA损伤时，该蛋白被泛素 化并参与 RAD6 依赖的 DNA 修复途径。已发现该基因有两个编码相同蛋白 质的转录变体。该基因的假基因已在4号染色体和X染色体上被描述。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人抗增殖细胞核抗原(PCNA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人抗增殖细胞核抗原(PCNA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PCNA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PCNA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.7-101.2
96.40
细胞裂解液(n=8)
92.6-105.9
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.1
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人PCNA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.7
91.30
88.6-96.2
93.50
90.3-110.3
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.3
94.20
87.9-108.0
98.30
105.3-115.2
108.60
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