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信号通路
英文名称: Human Microtubule-associated protein light chain 3B(LC3B) ELISA Kit
别名: LC3B
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 18.75-1200pg/mL
灵敏度: 9.34pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
微管相关蛋白轻链3B(LC3B)又称为自噬相关蛋白LC3B,是一种蛋白质,由LC3B基因编码。它是高度保守的ATG8蛋白家族的一个成员。ATG8蛋白存在于所有已知的真核生物体中。动物ATG8家族包括三个亚家族:微管相关蛋白1轻链3(MAP1LC3);16kDa的高尔基相关ATP酶增强剂(GATE-16)和γ-氨基丁酸受体相关蛋白(GABARAP)。它是MAP1LC3亚家族中的四个基因之一(其他包括MAP1LC3A、MAP1LC3C和LC3B2)。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人微管相关蛋白轻链3B(LC3B)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人微管相关蛋白轻链3B(LC3B)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的LC3B, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1200
600
300
150
75
37.5
18.75
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人LC3B , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.4-101.7
95.40
细胞裂解液(n=8)
96.9-108.8
105.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人LC3B , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.7
91.10
90.6-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.2
94.40
105.0-114.7
108.60
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