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信号通路
英文名称: Human Podoplanin (PDPN) ELISA Kit
别名: PDPN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.1ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Podoplanin是一种粘蛋白类型的蛋白质,质量为36-43kDa,由"PDPN"基因编码。它在物种间的保守性相对较好,在人类、小鼠、大鼠、狗和仓鼠中都有同源物。该基因编码的是一种I型、整体膜、重度O型糖基化的糖蛋白。该蛋白的生理功能可能与它的粘液蛋白类型特征有关。其他物种中的同源蛋白被描述为分化抗原和流感病毒受体。该蛋白被认为是肺部损伤的标志物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人平足蛋白(PDPN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人平足蛋白(PDPN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PDPN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.04
1.49
0.97
0.63
0.41
0.29
0.24
0.09
校正OD 值
1.95
1.4
0.88
0.54
0.2
0.2
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PDPN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.8-102.4
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.9-105.4
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.5
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人PDPN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.8-95.2
91.30
88.6-96.7
93.90
90.6-110.6
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.1
94.40
87.3-108.5
98.30
105.0-115.0
108.60
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