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信号通路
英文名称: Human Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) ELISA Kit
别名: MIF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
巨噬细胞移动抑制因子(MIF)又称糖基化抑制因子(GIF)、L-多巴色异构酶或苯丙酮酸同构酶,是一种由MIF基因编码的蛋白质。它是先天性免疫的一个重要调节因子。 MIF蛋白超家族还包括第二个具有功能相关特性的成员,即D-多巴色异构酶(D-DT)。CD74是MIF的表面受体。细菌抗原刺激白细胞释放MIF进入血流。循环中的MIF与其他免疫细胞上的CD74结合,引发急性免疫反应。因此,MIF被归类为一种炎症性细胞因子。此外,糖皮质激素也刺激白细胞释放MIF,因此MIF部分地抵消了糖皮质激素对免疫系统的抑制作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MIF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.1
1.78
1.51
1.04
0.76
0.45
0.3
0.07
校正OD 值
2.01
1.69
1.42
0.95
0.36
0.36
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MIF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.2
95.50
血浆(n=8)
92.6-107.6
104.20
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.2
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人MIF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.2
91.40
88.9-96.5
93.20
90.0-110.4
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.6-101.6
92.20
87.7-108.4
98.20
105.0-115.1
108.40
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