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信号通路
英文名称: Human Uridine Cytidine Kinase 2 (UCK2) ELISA Kit
别名: UCK2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.071ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
尿苷胞苷激酶2(UCK2),也被称为尿苷单磷酸激酶2(UMPK),是由UCK2基因编码的酶。该基因编码的蛋白质催化尿苷和胞苷分别磷酸化为尿苷一磷酸和胞苷一磷酸。这是在生产RNA和DNA合成所需的嘧啶核苷三磷酸的第一步。此外,该基因的等位基因可能在介导针对B型流感嗜血杆菌的非体液免疫中起作用。它是两种人尿苷-胞苷激酶之一。另一种UCK蛋白是尿苷-胞苷激酶1(UCK1),UCK1与它共享约70%的序列同一性。虽然UCK1在包括肝脏,骨骼肌和心脏在内的各种健康组织中无处不在,但UCK2仅在胎盘组织中检测到。它主要在癌细胞和健康的胎盘组织中检测到。靶组织中的选择性表达导致它被鉴定为抗癌治疗中的靶标。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人尿苷胞苷激酶2(UCK2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人尿苷胞苷激酶2(UCK2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的UCK2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.15
1.46
0.87
0.6
0.39
0.28
0.21
0.09
校正OD 值
2.06
1.37
0.78
0.51
0.19
0.19
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人UCK2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
93.5-105.9
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.4
104.10
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人UCK2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.7-96.9
93.20
92.6-110.6
96.90
1:04
范围
平均回收率
87.9-108.3
100.20
105.3-115.7
108.20
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