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信号通路
英文名称: Human Plasminogen Activator, Urokinase (uPA) ELISA Kit
别名: uPA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.469-30ng/mL
灵敏度: 0.24ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
尿激酶，又称尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA），是一种丝氨酸蛋白酶，由PLAU基因编码。尿激酶最初是从尿液中分离出来的，它也存在于血液和许多组织的细胞外基质中。这种酶的主要生理底物是浆蛋白原，它是丝氨酸蛋白酶浆蛋白的非活性形式（酶原）。尿激酶是一个411个残基的蛋白质，由三个结构域组成：丝氨酸蛋白酶结构域、环状结构域和EGF样结构域。尿激酶以酶原形式合成（prourokinase或单链尿激酶），并通过Lys158和Ile159之间的蛋白水解激活。产生的两条链通过二硫键保持在一起。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人尿激酶型纤溶酶原启动因子(uPA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人尿激酶型纤溶酶原启动因子(uPA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的uPA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
30
15
7.5
3.75
1.875
0.937
0.469
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人uPA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.8-101.6
96.30
组织匀浆(n=8)
92.0-105.0
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.5
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人uPA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.4
91.50
88.2-96.3
93.70
90.9-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.8
94.50
87.4-108.4
98.60
105.6-115.3
108.10
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