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信号通路
英文名称: Human Paraoxonase 1 (PON1) ELISA Kit
别名: PON1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 6.44ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
对氧磷酶1(PON1)也被称为A酯酶、高半胱氨酸硫酸盐酶或血清芳基磷酸酶1,是一种在人类中由PON1基因编码的酶。PON1是一个多基因家族中第一个被发现的成员,该家族还包括PON2和PON3,它们的基因在7号染色体上彼此相邻。人类PON1是一种由354个氨基酸组成的糖蛋白,分子量为43000道尔顿,在循环中与高密度脂蛋白结合。X-射线晶体学显示PON1的结构是一个6叶螺旋桨,有一个独特的盖子结构覆盖活性部位通道,允许与HDL结合。PON1负责水解有机磷农药和神经毒气,其基因的多态性显著影响该酶的催化能力。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人对氧磷酶1(PON1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人对氧磷酶1(PON1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PON1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PON1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.2
96.40
血浆(n=8)
92.6-105.1
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.8
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PON1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.0
91.90
88.9-96.3
93.10
90.4-110.1
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.4
94.40
87.2-108.6
98.20
105.0-115.6
108.40
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