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信号通路
英文名称: Human Dopa Decarboxylase (DDC) ELISA Kit
别名: DDC
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
芳香族L-氨基酸脱羧酶(AADC或AAAD),又称多巴脱羧酶(Dopa Decarboxylase,DDC)、色氨酸脱羧酶和5-羟基色氨酸脱羧酶,是一种裂解酶。该酶使用磷酸吡哆醇(PLP),维生素B6的活性形式,作为辅助因子。PLP对AADC的脱羧机制至关重要。在活性酶中,PLP作为希夫碱与AADC的赖氨酸-303结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人多巴脱羧酶(DDC)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人多巴脱羧酶(DDC)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的DDC, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.12
1.16
0.7
0.42
0.27
0.21
0.18
0.08
校正OD 值
2.03
1.07
0.61
0.33
0.12
0.12
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人DDC , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.4
95.10
细胞裂解液(n=8)
92.0-105.0
102.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人DDC , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.1
91.70
88.1-96.3
92.60
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
94.90
87.0-108.3
98.80
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