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信号通路
英文名称: Human Matrix Metalloproteinase 9 (MMP-9) ELISA Kit
别名: MMP-9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.079ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
基质金属蛋白酶9(MMP-9),又称92 kDa IV型胶原酶、92 kDa明胶酶或明胶酶B(GELB),是一种基质蛋白,属于锌金属蛋白酶家族的一类酶,参与细胞外基质的降解。MMP9基因编码一个信号肽、一个前肽、一个插入了三个重复的纤连蛋白II型结构域的催化结构域,然后是一个C端血浆蛋白样结构域。基质金属蛋白酶(MMP)家族的蛋白参与正常生理过程中细胞外基质的分解,如胚胎发育、生殖、血管生成、骨骼发育、伤口愈合、细胞迁移、学习和记忆,以及病理过程,如关节炎、脑内出血和转移。大多数MMPs以非活性原蛋白的形式分泌,当被细胞外蛋白酶裂解后被激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人基质金属蛋白酶9(MMP-9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人基质金属蛋白酶9(MMP-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MMP-9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.51
1.96
1.24
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.87
1.15
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MMP-9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.0
96.30
血浆(n=8)
92.9-105.7
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.8
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人MMP-9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.5
91.60
88.6-96.9
93.10
90.6-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.5
94.30
87.2-108.0
98.60
105.6-115.0
109.90
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