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信号通路
英文名称: Human Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4) ELISA Kit
别名: CDK4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.18ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
隐藏域元素占位
详细信息
简介
周期素依赖性激酶 4 也被称为细胞周期蛋白依赖性激酶 4 或细胞分裂蛋白激 酶 4,是一种由 CDK4 基因编码的酶。CDK4 是细胞周期蛋白依赖性激酶家 族的一个成员。该基因所编码的蛋白是 Ser/Thr 蛋白激酶家族的成员。该蛋 白与 S. cerevisiae cdc28 和 S. pombe cdc2 的基因产物高度相似。它是蛋 白激酶复合物的一个催化亚单位,对细胞周期 G1 期的进展很重要。该激酶 的活性仅限于 G1-S 期,由调节亚单位 D 型细胞周期蛋白和 CDK 抑制剂 p16INK4a 控制。该激酶被证明负责视网膜母细胞瘤基因产物(Rb)的磷酸 化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人周期素依赖性激酶4(CDK4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人周期素依赖性激酶4(CDK4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CDK4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人CDK4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.3-105.0
102.50
细胞裂解液(n=8)
96.4-108.7
105.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人CDK4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.8-100.1
93.20
90.6-110.9
96.80
1:04
范围
平均回收率
87.6-108.7
98.90
105.3-115.3
108.10
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