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信号通路
英文名称: Human Galactosidase Beta (glb) ELISA Kit
别名: GLb
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 125-8000pg/mL
灵敏度: 63pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
β-半乳糖苷酶,也称为乳糖酶、β-半乳糖苷,是一种糖苷水解酶家族,通过 打破糖苷键催化β-半乳糖苷水解为单糖。β-半乳糖苷包括含有半乳糖的碳水化合物,其中糖苷键位于半乳糖分子的上方。不同的β-半乳糖苷酶的底物包括神经节苷脂 GM1、乳糖甘油酰胺、乳糖和各种糖蛋白。β-半乳糖苷酶是一 种外糖苷酶,可以水解半乳糖和其有机基团之间形成的β-糖苷键。它也可以裂解岩藻糖和阿拉伯糖,但效率低得多。它是身体中的一种必需酶。该蛋白的缺陷可导致半乳糖醛酸症或莫基奥 B 综合征。在大肠杆菌中,lacZ基因是 β-半乳糖苷酶的结构基因;它作为诱导系统lac操作子的一部分存在,当葡萄糖水平低时,在乳糖存在下被激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人半乳糖苷酶β(GLb)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人半乳糖苷酶β(GLb)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GLb, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
8000
4000
2000
1000
500
250
125
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人GLb , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.3
96.90
血浆(n=8)
92.8-105.7
102.40
组织匀浆(n=8)
96.0-108.8
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人GLb , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.8
91.80
88.8-96.5
93.60
90.9-110.2
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.10
87.5-108.1
98.60
105.8-115.7
108.50
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