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信号通路
英文名称: Human Galectin 9 ELISA Kit
别名: GAL-9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 28.55pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
半乳糖凝集素9(Gal-9,Galectin-9)是从胚胎肾脏中分离出36 kDa的β-半乳糖凝集素蛋白。它由LGALS9基因编码。该蛋白有N端和C端碳水化合物结合结构域,由一个连接肽连接。已发现该基因有多种交替剪接的转录变体。Galectin-9是研究最多的HAVCR2(TIM-3)配体之一,在各种肿瘤细胞上表达。它也可以与其他蛋白(CLEC7A,CD137,CD40)相互作用。它还具有重要的细胞质、细胞内功能,并控制AMPK以应对溶酶体损伤,这种损伤在暴露于内源性和外源性膜损伤剂时可能发生,如晶体硅、胆固醇晶体、微生物毒素、蛋白病聚集物,如tau纤维和淀粉样蛋白,以及诱导溶酶体通透的信号通路。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人半乳糖凝集素9(GAL-9)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人半乳糖凝集素9(GAL-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GAL-9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.1
1.43
1
0.65
0.39
0.28
0.2
0.07
校正OD 值
2.01
1.34
0.91
0.56
0.19
0.19
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人GAL-9 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.8
96.40
血浆(n=8)
92.8-105.5
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.6-109.2
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人GAL-9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.9
91.90
88.2-96.2
93.70
90.8-110.2
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.4
94.50
87.8-108.1
98.20
105.3-115.6
108.50
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