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信号通路
英文名称: Human Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) ELISA Kit
别名: AGR2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 9.35pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
前梯度蛋白2(AGR-2),又称分泌型水泥腺蛋白XAG-2同源物,是一种在人类中由AGR2基因编码的蛋白质。在Xenopus中,AGR2在水泥腺分化中起作用,但在人类癌细胞系中,高水平的AGR2与p53反应的下调、细胞迁移和细胞转化相关。AGR2位于7p21染色体上,这是一个经常发生基因改变的区域。它是一种蛋白质二硫化物异构酶,有一个用于氧化和还原反应的CXXS活性域图案。且在底物中形成混合二硫化物,如肠道粘蛋白。它通过其硫氧素样结构域与MUC2中的半胱氨酸残基形成异二硫键,与MUC2相互作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人前梯度蛋白2(AGR2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人前梯度蛋白2(AGR2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的AGR2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.02
1.27
0.8
0.49
0.34
0.25
0.19
0.07
校正OD 值
1.93
1.18
0.71
0.4
0.16
0.16
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人AGR2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.2
96.80
血浆(n=8)
92.1-105.6
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.3
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人AGR2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.3
91.70
88.9-96.0
93.60
90.9-110.1
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.3
94.20
87.3-108.3
98.60
104.5-115.3
108.50
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