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信号通路
英文名称: Human Factor Related Apoptosis Ligand (FASL) ELISA Kit
别名: FASL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.85pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
凋亡相关因子配体(FASL或CD95L或CD178)是一种II型跨膜蛋白,属于肿瘤坏死因子(TNF)家族。它与受体的结合能诱导细胞凋亡。可溶性FAS配体是通过外部基质金属蛋白酶MMP-7在一个保守的裂解位点裂解膜结合的FASL而产生的。由FAS-FAS配体结合引发的细胞凋亡在免疫系统的调节中起着基本的作用。其功能包括:细胞毒性T细胞活性,免疫特权,母体耐受,肿瘤的反击。FAS配体/受体的相互作用在免疫系统的调节和癌症的进展中起着重要作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人凋亡相关因子配体(FASL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人凋亡相关因子配体(FASL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的FASL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.24
1.63
1.01
0.55
0.44
0.31
0.25
0.09
校正OD 值
2.15
1.54
0.92
0.46
0.22
0.22
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人FASL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.2
96.70
血浆(n=8)
92.4-105.9
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.5
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人FASL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.7
91.70
88.1-96.5
93.70
90.2-110.8
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.3
94.80
87.4-107.4
98.80
105.8-115.3
108.70
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