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信号通路
英文名称: Human Visfatin ELISA Kit
别名: Visfatin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.6pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
内脂素(Visfatin)又称烟酰胺磷酸核苷转移酶(NAmPRT酶或NAMPT),以前被称为前B细胞集落增强因子1(PBEF1),是一种酶,由NAMPT基因编码。 该蛋白的细胞内形式(iNAMPT)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)挽救途径中的限速酶,该途径将烟酰胺转化为烟酰胺单核苷酸(NMN),负责哺乳动物中大部分NAD+的形成。当ATP存在时,iNAMPT还可以催化从焦磷酸磷酰(PRPP)合成NMN。虽然PBEF最初的细胞因子功能至今没有得到证实,但后来其他人报告或建议该蛋白具有类似细胞因子的功能。特别是Nampt/PBEF最近被重新确认为一种 "新的内脏脂肪衍生激素",名为visfatin。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人内脂素(Visfatin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人内脂素(Visfatin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Visfatin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Visfatin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.6
96.10
血浆(n=8)
92.3-105.5
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.8
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人Visfatin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.6
91.70
88.7-96.0
93.10
90.0-110.7
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.8
94.90
87.0-108.8
98.80
105.8-115.6
108.30
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