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信号通路
英文名称: Human Immunoglobulin G4 (IgG4) ELISA Kit
别名: IgG4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.071ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
免疫球蛋白G4(immunoglobulin G4,IgG4)是较罕见的IgG亚型。IgG4是由Th2分泌的细胞因子如IL-4、IL-13等调节B细胞而产生的其对靶抗原的亲和性低,不能结合血清补体C1q,与 Fc受体的亲和力低,不能激活经典补体途径和活化细胞因子,但能抑制其他亚型免疫复合物的形成。IgG4 抗体通常是在非感染性环境中反复或长期暴露于抗原后形成的,并可能成为显性亚类。例如接受免疫治疗的长期养蜂人和过敏个体。在免疫治疗中,症状缓解似乎与 IgG4 诱导相关。转换为 IgG4 可能受 IL10 调节,将免疫应答的该亚类下调或耐受性诱导联系起来。IgG4 也可能代表对治疗性蛋白(如因子 VIII 和 IX)的免疫反应中的主要抗体亚类以及至少一些重组抗体,如阿达木单抗。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人免疫球蛋白G4(IgG4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人免疫球蛋白G4(IgG4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IgG4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IgG4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.1
96.80
血浆(n=8)
92.5-106.7
103.20
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.2
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IgG4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.2
91.60
88.9-96.7
93.40
90.2-110.9
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.1
94.60
87.4-108.8
98.20
105.1-114.2
107.40
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