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信号通路
英文名称: Human Signal Transducer And Activator Of Transcription 4 (STAT4) ELISA Kit
别名: STAT4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
信号传导子及转录激活子4(STAT4)是属于STAT蛋白家族的转录因子,由STAT1、STAT2、STAT3、STAT5A、STAT5B、STAT6组成。STAT蛋白是基因转录的关键激活体,在细胞因子梯度作用下与DNA结合。STAT蛋白是Janus激酶(JAK)信号通路的共同组成部分,由细胞因子激活。STAT4是由幼稚的CD4+T细胞发展成Th1细胞和对IL-12反应产生IFN-γ所必需的。有两种已知的STAT4转录物,STAT4α和STAT4β,在下游的干扰素-γ(IFN-γ)产生水平上有所不同。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人信号传导子及转录激活子4(STAT4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人信号传导子及转录激活子4(STAT4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的STAT4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.31
1.65
1.06
0.69
0.44
0.32
0.23
0.1
校正OD 值
2.22
1.56
0.97
0.6
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人STAT4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.2-101.0
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.1-106.5
102.60
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人STAT4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.9
91.70
88.7-96.4
93.70
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.3
94.90
87.4-108.1
98.50
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