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信号通路
英文名称: Human Signal Transducer And Activator Of Transcription 1 (STAT1) ELISA Kit
别名: STAT1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
信号传导子及转录激活子1(STAT1)是一种转录因子,由STAT1基因编码。它是STAT蛋白家族的一个成员。所有的STAT分子都被受体相关激酶磷酸化,从而导致激活,通过形成同源或异源二聚体进行二聚,最后转移到细胞核,作为转录因子发挥作用。具体来说,STAT1可以被几个配体激活,如α干扰素(IFNα)、γ干扰素(IFNγ)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、白细胞介素6(IL-6)或IL-27。I型干扰素(IFN-α、IFN-ß)与受体结合,通过激酶引起信号传导,使Jak激酶TYK2和JAK1以及STAT1和STAT2磷酸化并激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人信号传导子及转录激活子1(STAT1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人信号传导子及转录激活子1(STAT1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的STAT1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.28
1.63
1.04
0.69
0.45
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.19
1.54
0.95
0.6
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人STAT1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.2
96.10
血浆(n=8)
92.8-105.4
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.7
104.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人STAT1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.7
91.50
88.1-96.3
93.70
90.9-110.3
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.6
94.70
87.0-108.4
98.10
105.6-115.3
108.10
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