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信号通路
英文名称: Human Protectin (PT) ELISA Kit
别名: PT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 12.65pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
保护素(PT)也被称为MAC抑制蛋白(MAC-IP)、反应性裂解膜抑制剂(MIRL)或CD59糖蛋白,是一种由CD59基因编码的蛋白。它是一个LU结构域,属于LY6/uPAR/α-神经毒素蛋白家族。它通过一个糖磷脂酰肌醇(GPI)锚附着在宿主细胞上。当补体激活导致C5b678在宿主细胞上沉积时,它可以阻止C9聚合并形成补体膜攻击复合物。它还可能向细胞发出信号,使其采取积极措施,如CD59-CD9复合物的内吞作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人保护素(PT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人保护素(PT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.28
1.85
1.23
0.8
0.53
0.39
0.3
0.08
校正OD 值
2.19
1.76
1.14
0.71
0.3
0.3
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人PT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-102.1
96.10
血浆(n=8)
92.7-106.8
103.90
细胞裂解液(n=8)
96.8-108.1
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞裂解液中加入高浓度人PT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.10
88.0-97.9
93.60
90.2-110.5
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.3
94.90
87.8-108.9
98.80
105.7-114.2
107.50
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