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信号通路
英文名称: Human Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor (MANF) ELISA Kit
别名: MANF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 6.78pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中脑星形胶质细胞来源神经营养因子(MANF)是一种蛋白质，是由MANF管家基因编码的。它是一种高度保守的蛋白质，其功能是已知的。该蛋白最初被认为在N端较长，并包含一个富含精氨酸的区域，但转录的证据表明，一个较小的开放阅读框并不编码精氨酸束。据报道，在各种实体瘤中存在一种特殊的突变，将以前编号的第50号密码子从ATG改为AGG，或删除该密码子。随着蛋白质大小的修正，这个密码子现在被确定为起始密码子。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人中脑星形胶质细胞来源神经营养因子(MANF)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中脑星形胶质细胞来源神经营养因子(MANF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MANF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.47
1.4
0.77
0.46
0.32
0.22
0.2
0.08
校正OD 值
2.38
1.31
0.68
0.37
0.13
0.13
0.11
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MANF , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.1-101.1
96.60
血浆(n=8)
92.2-105.8
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.1
105.90
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人MANF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.3
91.70
88.3-96.6
93.20
90.7-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.4
94.30
87.0-108.5
98.60
105.7-115.0
108.60
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