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信号通路
英文名称: Human Midkine (MK) ELISA Kit
别名: MK
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 35.8pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中期因子(MK)又称神经元生长促进因子2（NEGF2），是一种由MDK基因编码的蛋白质。它是一种低分子量的基本肝素结合的生长因子，与pleiotrophin（NEGF1，与MK同源46%）形成一个家族。它是一个非糖基化的蛋白质，由两个由二硫桥连接的结构域组成。它是一种重要的发展性视黄酸反应基因产物，在妊娠中期被强烈诱导，因此被称为midkine。它具有多效性，能够发挥诸如细胞增殖、细胞迁移、血管生成和纤维蛋白溶解等活动。一个包含受体型酪氨酸磷酸酶zeta（PTPζ）、低密度脂蛋白受体相关蛋白（LRP1）、无色素白血病激酶（ALK）和syndecans的分子复合物被认为是其受体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人中期因子(MK)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中期因子(MK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MK, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MK , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.6-104.1
101.20
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.7
105.30
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人MK , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.0-96.5
93.30
90.5-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
86.5-108.5
97.10
105.9-115.1
108.90
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