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信号通路
英文名称: Human Neutrophil defensin 1(HNP-1) ELISA Kit
别名: HNP-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.159ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中性粒细胞防御素-1(HNP-1)也被称为防御素α1、α防御素1或中性粒细胞肽1(HNP-1),它是一种蛋白质,由DEFA1基因编码。防御素是一个被认为参与宿主防御的杀微生物和细胞毒性肽的家族。它们大量存在于中性粒细胞的颗粒中,也存在于粘膜表面的上皮中,如肠道、呼吸道、尿道和阴道。防御素家族的成员在蛋白质序列上高度相似,并以一个保守的半胱氨酸图案来区分。几个α防御素基因集中在8号染色体上。该基因所编码的蛋白,即防御素α1,存在于中性粒细胞的杀菌颗粒中,并可能在吞噬细胞介导的宿主防御中起作用。它与防御素、α2和α3只有一个氨基酸的区别。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人中性粒细胞防御素-1(HNP-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中性粒细胞防御素-1(HNP-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HNP-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.04
1.61
1.23
0.84
0.53
0.35
0.23
0.08
校正OD 值
1.95
1.52
1.14
0.75
0.26
0.26
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人HNP-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-102.8
97.90
血浆(n=8)
92.4-105.6
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.8
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人HNP-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.9
91.70
88.7-96.6
93.50
90.2-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.0
94.20
86.7-108.6
97.30
105.7-115.1
108.40
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