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信号通路
英文名称: Human Neutrophil extracellular trap network(NETs) ELISA Kit
别名: NETs
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.625-40ng/mL
灵敏度: 0.311ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)是细胞外纤维的网络，主要由中性粒细胞的DNA 组成，它与病原体结合。中性粒细胞是免疫系统对抗感染的第一道防线， NETs 使中性粒细胞能够杀死细胞外病原体，同时最大限度地减少对宿主细胞的损害。在体外用药理学制剂乙酸苯丙醇酯（PMA）、白细胞介素 8（IL-8） 或脂多糖（LPS）激活后，中性粒细胞释放颗粒蛋白和染色质，通过一个主动过程形成称为 NET 的细胞外纤维基质。NETs 在炎症部位大量产生，并在局部提供高浓度的抗菌分子，捕获并杀死各种病原体，快速控制病菌在体内感染，起到免疫抗菌。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的NETs, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人NETs , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.9
96.50
血浆(n=8)
92.7-105.5
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.0
105.40
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人NETs , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.4
91.10
88.8-96.6
93.10
90.7-110.1
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.7
94.80
87.6-108.4
98.70
105.0-115.3
108.80
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