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信号通路
英文名称: Human Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) ELISA Kit
别名: NGAL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 7.5pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是一种由LCN2基因编码的蛋白质。NGAL通过封存铁并阻止细菌使用,从而限制其生长,参与先天免疫。 它在中性粒细胞中表达,在肾脏、前列腺、呼吸道和消化道的上皮细胞中也有低水平表达。在急性肾损伤(AKI)的情况下,NGAL会在损伤后2小时内高水平地分泌到血液和尿液中。AKI患者的NGAL水平与他们的预后严重程度有关,可作为AKI的生物标志物,NGAL也可作为慢性肾脏病、造影剂诱导的肾病和肾移植等手术的早期诊断。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的NGAL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.48
1.65
1.07
0.71
0.45
0.28
0.19
0.09
校正OD 值
2.39
1.56
0.98
0.62
0.19
0.19
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人NGAL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.7
95.70
血浆(n=8)
92.1-105.2
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.0
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人NGAL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.6
91.30
88.8-96.4
93.20
90.1-110.0
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.9
94.20
87.5-108.2
98.60
105.8-115.8
108.10
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