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信号通路
英文名称: Human Neprilysin (NEP) ELISA Kit
别名: NEP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 5.87pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、脑脊液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脑啡肽酶,又称膜金属内肽酶(MME)、中性内肽酶(NEP)、分化簇10(CD10)和普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA),由MME基因编码的酶。脑啡肽酶是一种锌依赖性金属蛋白酶,可切割疏水残基氨基侧的肽,并使多种肽激素失活,包括胰高血糖素,脑啡肽,P物质,神经降压素,催产素和缓激肽。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人中性内肽酶/脑啡肽酶(NEP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人中性内肽酶/脑啡肽酶(NEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的NEP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.62
0
OD值
2.23
1.42
0.83
0.5
0.31
0.23
0.18
0.08
校正OD 值
2.14
1.33
0.74
0.41
0.14
0.14
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人NEP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.3
96.20
血浆(n=8)
92.4-105.4
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.4
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人NEP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.1
91.70
88.6-96.7
93.90
89.2-110.8
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.1
94.40
87.4-108.3
98.10
104.8-115.8
108.70
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